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供应 动物组织基因组提取试剂盒 ----100T

生物级,动物组织基因组提取试剂盒,100T 展开

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更新时间 : 2024-05-30
产品特性试剂盒是否进口
产地北京品牌中科金研
产品规格100T主要用途各类下游分子生物学实验
是否危险化学品产品名称动物组织基因组提取试剂盒
有效物质含量其它%执行标准/
CAS/特色服务/
展开

供应 动物组织基因组提取试剂盒 ----100T

本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统,从样品中分离纯化高质量基因组DNA,特殊包被的磁珠,在一定条件下对目的DNA具有很强的亲和力,而当条件改变时,磁珠释放吸附的DNA,能够达到快速分离纯化DNA的目的。整个过程不涉及有毒试剂,安全、便捷、提取的DNA纯度高。使用本试剂盒纯化的基因组DNA均在1.7~2.0之间,可以应用到各类下游分子生物学实验。

 

货  号

名  称

规  格

MB60909-100

磁珠法动物基因组DNA提取试剂盒

100T

 

适用范围

从动物组织中提取基因组DNA,适用于核酸自动化提取平台。

 

试剂盒包装及组成

试剂盒组成

数量

裂解液S1

50ml*1

裂解液S2

20ml*1

结合液

50ml*1

磁珠

1.5ml*2

洗脱液

20ml*1

使用说明书

1份

 

注意事项

1、 磁珠使用***定要充分混匀。

2、如果下游实验对RNA 污染比较敏感,可在裂解时加1μl RNaseA(10mg/ml)。

3、如果是干材料,适当延长裂解时间;种子用粉碎机打成粉末状使用,样品为种子时,裂解时间为30min。

4、如果同等取样量下欲得到更多DNA 可以增加洗脱次数(洗脱次数不要超过3 次),也可以适当延长裂解时间。

5、取材量参照下面表格

材料

取样量

动物肌肉组织

<50mg

脂肪

<50mg

脾脏

<20mg

肝脏

<20mg

胰脏

<20mg

 

操作步骤

1、裂解

取新鲜动物组织10mg~50mg,与研钵中研磨。加入480μl 裂解液S1、120μl 裂解液S2、20μl 蛋白酶 K,研磨均匀,然后转移至1.5ml EP 管中,吹打或点阵混合均匀。然后把EP 管置于恒温水箱中65℃温育15~30min。

2.结合

将EP管从温育设备中取出,12000rpm 离心10min。取500 μl 上清,加入振荡混匀的磁珠30μl、500μl 结合液(也可加入500μl 异丙醇,产量高于加结合液,但A260/A280略有降低,不影响下游实验),颠倒混匀2min,时文静置1min。将EP 管置于磁力架上进行磁分离,吸弃废液(注意吸净管盖及管底残液)。

3.洗涤

⑴ 加入600μl 70% 乙醇,吸打或点振5~10 次,然后磁分离,注意吸净管盖及管底的残液;

⑵ 重复步骤⑴一次,室温下开盖干燥10-20min或恒温箱(不高于55℃)内开盖干燥5min,注意防止污染。

4.洗脱

加入100μl 洗脱液,缓慢抽吸混匀,65℃温浴10min。每隔2~3min 轻摇EP管几下混匀。然后磁分离,小心吸取上清液至新的EP管中,即可进行下游实验。

 

常见问题及参考意见

得率低

(1)样品没有研磨充分,请尽量将样品研磨充分;

(2)组织没有完全裂解完,裂解时间不够或没有离心直接进行下一步操作;

可适当延长裂解时间,最长不超过60min。样品裂解后,请一定要离心后再进行下一步操作;

(3)结合不充分;

结合过程中要使磁珠一直处于悬浮状态,并且充分颠倒混匀;

(4)取样量大于说明书给出量;

取样量请严格按照说明书操作。

条带弥散

(1)样品不新鲜或反复冻融多次:尽量用新鲜样品进行试验,如果样品需要保存,可根据试验,分装保存样品,尽量避免反复冻融;

(2)研磨时间太长,造成核酸降解:请研磨尽量迅速,防止DNA 降解;

(3)环境温度太高:可以将研钵置于-20℃预冷或置于液氮保存后再进行研磨,如果所提取材料基因组极易降解,可用液氮研磨;

(4)裂解时间太长:裂解时间不要超过60min;

(5)提取后模板DNA 放置时间太长:提取后如有需要,请尽量及时进行电泳试验。短期内可置于4℃保存,长期请置于-20℃保存(尽量注意避免反复冻融)。

DNA液有颜色

(1)洗涤过程不充分:如果结合后磁珠呈团状、丝状或颗粒状,要增加点震力度及次数,充分吹打混匀。

(2)裂解不充分:将组织充分研磨、适当增加裂解液S1和S2用量,也可以延长裂解时间。

(3)样品用量大于说明书给出量而其他试剂用量没有相应调整:严格按照说明书操作,如果需要增大样本量,可以等比例增大裂解液S1、S2、蛋白酶 K以及磁珠用量,其他试剂用量可不改变。

DNA样品不纯,干扰后续实验

(1)DNA液有乙醇残留:洗涤时,请注意吸净管盖及管底的残液。此外,磁珠应完全干燥,***无乙醇残留。

(2)磁珠洗涤不充分:加入70% 乙醇时,请吸打或点振混匀。如有必要,可增加一次洗涤步骤。

(3)DNA液中吸入磁珠:如果不小心吸入磁珠,请将上清液返回原管,待磁珠完全吸附至管壁后重新吸取上清。或者将吸取的上清液10,000rpm离心2min,再取上清。

(4)DNA液中含有蛋白质等杂质:建议适当减少样品用量。

(5)DNA液中含有轻微盐离子等杂质,此为TE保存液正常现象,不影响下游实验。如有特殊需要,可使用等量的经高压灭菌的去离子水作为洗脱液。为方便实验,可将获得的DNA液置于-20℃环境分装保存。


供应商信息

中科金研(北京)科技有限公司,是一家生产高纯金属材料、金属粉末、金属块材、陶瓷粉料、蒸发镀膜材料以及溅射靶材的高新技术企业。公司拥有自己的工厂和研发团队,本着高效 专业 优质的经营理念,已经逐步发展成为一支具有强劲竞争力和创造力的精英团队,成为众多企业及科研单位***的材料供应商。 公司专业技术处水平,生产能力居我国***。 公司同国内多家企业科研机构,进行合作,拥有丰富的行业产品应用经验和开发能力。同时,具备完善的产品检测设备。已通过ISO9001质量管理体系认证,ISO14001环境管理体系认证、多项产品达到欧盟"ROHS"标准。 公司秉承“专业、创新、务实、真诚、高效”的经营理念,崇奉勤勉、团结、合作的团队精神,以技术为核心、视质量为生命,坚持“依靠高素质的人才,生产高技术的产品,实行高标准的管理,实现高效益的企业”的经营宗旨,立足北京、面向全国,胸怀全球,产品满足国内市场的同时,积极拓展海外市场,营销网络正逐步向欧亚及南北美洲等国家和地区市场延伸,力使公司的国际竞争力得到进一步提升,打造******。

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企业类型 有限责任公司(自然人投资或控股) 统一社会信用代码 91110105MA0184M02R
成立日期 2017-10-16 法定代表人/负责人 陶晋
注册资本 1,000万(元) 注册地址 北京市朝阳区双营路11号院4号楼10层2单元1110
营业期限 2017-10-16 至 2047-10-15 登记机关 北京市朝阳区市场监督管理局
经营范围 技术服务、技术转让、技术开发、技术推广、技术咨询;销售金属材料、化工产品(不含危险化学品)、电子产品、 陶瓷制品。(市场主体依法自主选择经营项目,开展经营活动;依法须经批准的项目,经相关部门批准后依批准的内容开展经营活动;不得从事国家和本市产业政策禁止和限制类项目的经营活动。)
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